Codex Sinaiticus ditulis pada pertengahan abad keempat dalam aksara majuscule Alkitab - istilah untuk tulisan yang digunakan pada Codex Sinaiticus dan teks-teks lain yang relevan - dalam empat kolom (teks puisi ditulis dalam dua kolom), di atas perkamen yang dipersiapkan dengan sangat teliti. Mungkin karya ini termasuk salah satu dari lima puluh karya yang ditugaskan Konstantinus Agung kepada Eusebius dari Kaisarea di Palestina dan bengkel kaligrafi di "Sekolah"-nya; kalaupun tidak demikian, penanggalannya sangat dekat.
Codex Sinaiticus berisi teks-teks Perjanjian Lama dan Perjanjian Baru, serta dua Bapa Apostolik. Bagian terbesar dari Codex Sinaiticus kini disimpan di British Library (Brit. Mus. Addit. 43725), yang kemudian dijual secara ilegal oleh Negara Soviet pada tahun 1933. Dua belas halaman ini dan beberapa fragmen lain yang melengkapi "Codex Sinaiticus" yang terkenal dari Alkitab ditemukan kembali pada tahun 1975, di antara penemuan-penemuan baru lainnya.